文献速递ㅣ动物活体成像系统在外泌体研究中的应用

细胞外囊泡(Extracellular vesicles，EVs)是来源于细胞的脂质双层包裹的纳米囊泡。外泌体(Exosomes)作为EVs的一个亚型，由于具有体积较小、能跨越生物屏障、循环稳定和固有靶向性等特性，成为非常有吸引力的药物输送载体。目前对于外泌体的获取，主要是基于差速超速离心，对细胞培养上清液的外泌体进行离心分离、收集和浓缩；但是在分析外泌体的内容物、研究其功能或用于治 疗应用之前，储存条件对sEVs(small EVs)特性的影响还没有完全阐明，也缺乏对不同储存条件的对比评价。

▲  典型的外泌体结构。外面由磷脂双层包围，含有对运输很重要的膜联蛋白；用于细胞靶向的四环素以及参与其他生物过程的蛋白。

近日，中南大学、湖南省转化医学与创新药物工程研究ZX向大雄教授课题组通过差速超速离心分离获得bEnd.3细胞来源的sEVs，并测试了保存条件对sEVs的大小、数量、蛋白质/RNA含量和与治 疗应用相关的性质影响。在研究不同储存温度对sEVs在活体治 疗应用的影响时，采用博鹭腾AniView100多模式动物活体成像系统进行了连续纵向检测sEVs在活体体内生物分布。结果直观清晰地显示储存会显著影响bEnd.3细胞来源的sEVs的脑靶向能力；因此，对于sEVs的治 疗应用，应使用新鲜的sEVs或可在-80℃下短期保存备用。相关成果已发表在期刊《Drug Delivery》，可为未来sEVs的商业化储存提供参考。

▲  使用博鹭腾AniView100拍摄的sEVs在小鼠体内和体外器官的生物分布结果。

(A) sEVs在健康小鼠体内的生物分布

(B) 在小鼠主要器官的生物分布

(C) sEVs在小鼠脑部生物分布比较

(D) sEVs在小鼠器官中的荧光信号强度

(E) sEVs在小鼠脑部荧光信号的强度

参考文献：

1、Wu J Y , et al. Preservation of small extracellular vesicles for functional analysis and therapeutic applications: a comparative evaluation of storage conditions[J]. Drug Delivery, 2021, 28(1):162-170.

2、Kourembanas, Stella. Exosomes: Vehicles of Intercellular Signaling, Biomarkers, and Vectors of Cell Therapy[J]. Annual Review of Physiology, 2015, 77(1):13-27.